مقایسه برخی از فاکتورهای حدت اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک 99K با دو روش PCR و SDS-PAGE

سابقه و هدف: اسهال ناشی از اشریشیاکلی 99K در گوساله‌ها به ویژه در نخستین روزهای پس از تولد، به علت تلفات و خسارات اقتصادی حاصله از اهمیت زیادی برخوردار است. در این مطالعه شیوع ژن‌های عوامل بیماریزایی اشریشیاکلی 99 K  با استفاده از تکنیک Multiplex PCR و سپس الگوی پروتئینی این باکتری ها با روش های مختلف بید، اوره و پودر شیشه با SDS- PAGE ارزیابی گردید. موادوروش ها: 300 سواب رکتوم از گوساله‌های 1 تا 30 روزه  مبتلا  به  اسهال  طی سال های 1390-1389 جمع‌آوری شد. یک بخش جهت انجام Multiplex PCR برای شناسایی ژن‌های عوامل بیماریزایی 99K، 41F و STa  استفاده گردید و بخش دیگر جهت کشت بر روی محیط‌های مختلف جهت جداسازی اشریشیا کلی و  SDS-PAGE مورد استفاده قرار گرفت. یافته ها: نتایج PCR نشان داد از 200 اشریشیاکلی جداشده، 16مورد دارای ژن‌های عوامل بیماریزایی 99K، 41 Fو STa    می‌باشند و در هیچکدام از نمونه های جدا شده از گوساله ها سم حساس به حرارت  LT))وجود نداشت. همچنین نتایج حاصل از SDS-PAGE نشان داد که الگوهای پروتئینی باکتری های مختلف اشریشیا کلی متفاوت می باشد. نتایج SDS-PAGE حاصل از ستون بیانگر وجود تنها یک باند مربوط به آنتی ژن 99K بود. نتیجه گیری: مشاهده فاکتورهای حدت باکتری های اشریشیا کلی 99K جدا شده نشان داد که همه باکتری ها حداقل دارای سه ژن 99K، 41F و  Staمی باشند. با وجود این که از نظر مولکولی تفاوت معنی داری در بین نمونه ها مشاهده نشد. اما از نظر الگوی پروتئینی تفاوت های قابل ملاحظه ای در بین باکتری های جدا شده وجود داشت. بنابر این می‌توان نتیجه گرفت که باکتری های متفاوت الگوهای پروتئینی مختلف و در نتیجه بیماریزایی متفاوتی دارند.